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蛋白酶K的原理和應(yīng)用
  • 發(fā)布日期:2024-03-05      瀏覽次數(shù):322
    • 新型蛋白酶 K(Proteinase K)的基因序列來源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)的 蛋白酶 K 基因,經(jīng)過了基因定點(diǎn)突變和酵母細(xì)胞分泌表達(dá)、色譜純化。經(jīng)過蛋白質(zhì)工程化的新型蛋白酶 K 提高了比活性和純度,不含有細(xì)菌內(nèi)毒素,應(yīng)用范圍比天然蛋白酶 K 更廣泛。

      新型蛋白酶 K 是現(xiàn)有蛋白酶中活性最高的品種,在 pH 4 到 pH 12 的條件下均 有活性,反應(yīng)溫度介于 0~75oC 之間。在常用濃度的 SDS、尿素或 EDTA 存在時(shí)亦很 穩(wěn)定。酶切割位點(diǎn)在脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,可以用于所有蛋白質(zhì)的降解。目前主要應(yīng)用于基因診斷試劑盒、基因組 DNA 提取試劑盒、RNA 提取試劑盒中去除核酸酶和其它蛋白污染。


      新型蛋白酶 K 的應(yīng)用也包括工業(yè)領(lǐng)域提取非蛋白類生物制品核酸、多糖類藥物,譬如 DNA 疫苗和肝素的制備,也可用于皮膚保健去除老化角 質(zhì)層細(xì)胞、糅皮、制備水解蛋白調(diào)味品等場(chǎng)合,取代其它蛋白酶種類。