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金屬硫蛋白（metallothionein，MT)是一類廣泛存在于生物中的低分子質(zhì)量(6 ~ 7 kD)、無(wú)芳香族氨基酸、富含金屬與半胱氨酸( Cys 20 %?30 % )的生物學(xué)特性的金屬結(jié)合蛋白。1957年，美國(guó)科學(xué)家Margoshes和Vallee最早從馬腎中分離得到金屬硫蛋白，繼1975年P(guān)rinz從釀酒酵母中分離得到Cu- MT后，1977年科學(xué)家又從大豆的根中分離出富含Cd2+的類金屬硫蛋白。

金屬硫蛋白中大量巰基賦予了其螯合重金屬離子功能及重金屬解毒作用，同時(shí)MT清除自由基的能力明顯強(qiáng)于超氧化物歧化酶和谷胱甘肽，并調(diào)節(jié)生物體內(nèi)微量元素濃度，調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、增殖分化，在食品、醫(yī)藥、保健、環(huán)境、化妝品、生物工程等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。近年來(lái)，M T由于它的生物學(xué)功能，逐漸受到重視并成為研究的熱點(diǎn)。

1. 金屬硫蛋白的提取技術(shù)

關(guān)于M T的結(jié)構(gòu)與功能的研究是當(dāng)今化學(xué)、生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的重要課題之一，隨著研究工作的不斷深人，對(duì)M T的用量和純度的要求越來(lái)越高。勻漿離心法是提取海洋生物中MT最常采用的方法，提取劑選擇性質(zhì)穩(wěn)定且與生理體液相容性好的Tris- HCl(簡(jiǎn)稱Tris)緩沖溶液。不同濃度、p H 的提取液，以及樣本與緩沖液的質(zhì)量體積比、勻漿液離心轉(zhuǎn)速大小，時(shí)間長(zhǎng)短，都會(huì)對(duì)MT的提取率產(chǎn)生影響。因此，不同的方法，提取的MT含量和純度等也不盡相同。

2.  金屬硫蛋白的分離純化技術(shù)

為深人研究金屬硫蛋白結(jié)構(gòu)和功能特性及其相關(guān)性，需要對(duì)金屬硫蛋白提取液進(jìn)行濃縮處理。在蛋白的純化過(guò)程中，一次性處理較多樣品時(shí)，可以采用超濾法進(jìn)行脫鹽濃縮，不但耗時(shí)短，濃縮的效率高，而且可降低蛋白質(zhì)的損失率。目前，金屬硫蛋白分離純化技術(shù)主要有：膜分離技術(shù)、高效液相色譜、凝膠過(guò)濾色譜、離子交換色譜、毛細(xì)管電泳法等。

使用的方法是凝膠過(guò)濾和離子交換技術(shù)相結(jié)合方法。凝膠過(guò)濾法的缺點(diǎn)是不能將MT的亞型分開，所以一般采用高效液相色譜法（HPLC)對(duì)MT進(jìn)行微量分離。高效液相色譜具有分離效果好、精密度與靈敏度佳、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)于復(fù)雜成分的分離鑒定更有應(yīng)用價(jià)值。

ICPMS技術(shù)干擾較少，精密度高，分析速度快，檢出限較低，動(dòng)態(tài)線性范圍寬，并且可提供準(zhǔn)確的同位素信息。高效液相色譜法（HPLC )與質(zhì)譜儀(ICP-MS )聯(lián)用，不僅可以將微量MT分離，還能將MT亞型較好地分離，從而獲得較高純度的金屬硫蛋白。